一、“人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒”詳細(xì)參數(shù)

規(guī)格：96Ｔ

品牌：ＲＤ

保存條件：2-8℃低溫保存

保質(zhì)期：六個(gè)月

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【ELISA試劑盒】提供免費(fèi)檢測(cè)服務(wù)：使用我公司試劑盒,只收取試劑盒的費(fèi)用,其他輔助試劑全部免費(fèi)。我們將根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量和難易程度，雙方協(xié)定實(shí)驗(yàn)周期，保質(zhì)保量完成委托實(shí)驗(yàn)，并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果和材料用特快專遞免費(fèi)寄送到您手中。

二、人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問(wèn)題       
一、所有孔未顯色？
分析原因：      
1、微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。          
2、用錯(cuò)試劑。          
3、在操作中忘記加酶或抗體。     
 解決辦法：            
1、檢查洗板器械，比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。          
2、在加樣前，要看清瓶簽。          
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，確保每步都到位。          
二、所有孔顯色偏低？
分析原因：    
1、微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。          
2、洗板不干凈。          
3、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。          
4、溫度沒(méi)達(dá)到要求。          
5、每孔加入的試劑量低于說(shuō)明書(shū)要求量。      
解決辦法：     
1、手工加蒸餾水洗板時(shí)，要避免吸頭接觸微孔，常更換新的蒸餾水。    
2、洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水（約400ul），且至少洗板五次。      
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)要求操作，每次取樣要更換吸頭。      
4、控制孵育溫度在25℃。       
5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足，加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。 

人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒Elisa實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備

1仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存)，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見(jiàn)技術(shù)指南
8選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì)；若選擇兩個(gè)單抗，必須識(shí)別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對(duì)。
9ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí)，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說(shuō)明書(shū)常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
10標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書(shū)中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
11一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
12為了優(yōu)化靈敏度，建議過(guò)一夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
13若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。
14當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí)，如血清，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.

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