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雙抗體夾心法檢測HBsAg試劑盒

  • 發(fā)布日期:2016-07-12      瀏覽次數(shù):1780
    • 關(guān)鍵詞:HBsAg試劑盒ELISA 簡介:ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關(guān)液體中ACA IgA含量。 產(chǎn)品報價說明: 產(chǎn)品名稱:HBsAg試劑盒ELISA 規(guī)格:96T/48T 運(yùn)輸:2~8°保存運(yùn)輸 服務(wù):提供免費(fèi)代測服務(wù),提供。

      以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標(biāo)本加入,共同孵育后,抗原結(jié)合于包被抗體上,再加入酶標(biāo)記特異抗體(酶標(biāo)抗HBs),酶標(biāo)抗體連接到抗原上,zui后加入底物溶液,根據(jù)顏色反應(yīng)來判定抗原含量。

      使用目的:
      本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中乙肝表面抗原ELISA試劑盒(HBsAg)含量。
      實(shí)驗(yàn)原理
      本試劑盒應(yīng)用間接法測定標(biāo)本中人乙肝表面抗原(HBsAg)水平。用純化的人乙肝表面抗原(HBsAg)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的乙肝表面抗原(HBsAg)標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的HBsAg待檢樣品,溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙肝表面抗原(HBsAg)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人乙肝表面抗原(HBsAg)濃度。

      一、材料

      HBsAg試劑盒,本試劑盒含: 

      1、包被抗-HBs反應(yīng)條 1瓶

      2、酶結(jié)合物 1瓶

      3、HBsAg陽性對照 1瓶

      4、HBsAg陰性對照 1瓶

      5、洗滌液:用前每瓶作1:20稀釋 1瓶

      6、顯色劑(TMB)A 1瓶

      7、顯色劑(TMB)B 1瓶

      8、終止液 1瓶

      二、方法

      1、加入待測標(biāo)本每孔0.05ml,并設(shè)HBsAg陽性對照2孔,HBsAg陰性對照2孔,空白對照1孔,然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml、空白對照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。

      2、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔,棄去拍干,反復(fù)五次后拍干。

      3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。

      4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。

      三、結(jié)果

      比色法:波長450nm,先用空白孔校零點(diǎn),然后讀取各孔光密度值。

      樣品OD值/陰性對照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性,否則為陰性。

      備注:陰性對照平均OD值低于0.05作0.05計(jì)算,高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。陽性對照OD值≥0.8,實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效。 

      四、注意事項(xiàng)

      1、試劑盒置2℃~8℃保存。

      2、使用前試劑應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加。

      3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測標(biāo)本所需微孔條,置室溫平衡30分鐘后再行測試,余者應(yīng)及時封存于冰箱中以備后用。

      4、待測標(biāo)本不可用NaN3防腐。

      5、不同批號試劑請勿通用。

      6、結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。

      7、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時,請置37℃至溶解。

       

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