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東南大學劉老師咨詢細胞裂解液檢測IL-24指標樣本收集問題

  • 發布日期:2015-12-16      瀏覽次數:796
    •     2015年三月份東南大學張同學在我司代測了人IL-24 ELISA試劑盒,現張同學的實驗課題已圓滿結束。同實驗室學生劉同學受張同學介紹昨日我司銷售部吳,準備近期同樣做人IL-24 ELISA試劑盒的課題檢測。準備收集人的細胞裂解液樣本做檢測。關于樣本的收集方法希望得到我司的。溝通結束后,我司技術部以WORD文檔形式詳細整理了細胞裂解液的收集方法答復劉老師。劉老師也表示,樣本預計半個月左右收集完成,收集完成后將樣本交由我司進行代測。期間任何技術問題我司*時間提供。

      細胞裂解液收集方法:

      1).吸去培養板內的培養基,用胰酶消化細胞,加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省略。

      2).收集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養基,用預冷的PBS潤洗3次。

      3) .加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。

      4).將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復凍融幾次,使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以達到裂解的目的。

      5).4℃ 10000×g 離心10min,除去細胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。

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