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做全血DNA提取實驗時應(yīng)該怎樣選擇抗凝劑

  • 發(fā)布日期:2015-10-29      瀏覽次數(shù):4505
    • 在醫(yī)學(xué)實驗中常需動物的全身抗凝,采出的全血或血漿有的也需加入適當?shù)目鼓齽┛鼓?。對抗凝劑的要求是:用量少、溶解度大、不帶進干擾實驗的雜質(zhì)。

      1.從全血中制備基因組DNA,ACD做為抗凝劑要優(yōu)于EDTA,因為他更加能保存高分子質(zhì)量的DNA,然而,血樣常常被收集于用定量EDTA作為抗凝劑的小管中。
      2.在大多數(shù)美國的醫(yī)院中,收集血樣的小管均用顏色標明是否含有抗凝劑,紫色頂管蓋的小管一般含有抗凝劑,通常是EDTA的干粉。黃色頂蓋的小管不含抗凝劑。
      3.在分子克隆實驗中,前者一般用于收集血樣用于制備基因組的DNA,后者用于收集血樣作為用EB病毒的永生化淋巴細胞的來源。這些永生化的細胞可以作為可更新的來源來制備大量的DNA以備后用,如進行遺傳學(xué)的研究等等!

      注意事項:血液可以在0度條件下保存一周左右,或者是零下70度條件下無限期保存!做全血DNA提取的時候抗凝劑不能采用肝素!因為肝素是聚合酶鏈式反應(yīng)的抑制劑!

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