去甲腎上腺素ELISA試劑盒使用說明書

去甲腎上腺素ELISA試劑盒使用說明書

(上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司)

1、應(yīng)用范圍

此試劑盒可用于人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測(cè)。

2、臨床意義

兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會(huì)增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測(cè)對(duì)于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開始時(shí)有提取步驟，用戶可使用各種動(dòng)物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所有動(dòng)物的兒茶酚胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測(cè)大鼠、小鼠或其它動(dòng)物。

3、實(shí)驗(yàn)原理

此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個(gè)抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標(biāo)二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。

4、貯存與穩(wěn)定性

試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。

5、樣品的采集與儲(chǔ)存

注意	人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會(huì)受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時(shí)內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMT抑制劑，還有降血壓類藥物。

血漿（EDTA）

注意	血液采集后兩小時(shí)內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。
注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項(xiàng)。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測(cè)時(shí)都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。
貯存		2-8℃	≤-20℃	避免熱源或太陽直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。
穩(wěn)定性		6h	1個(gè)月

尿液

可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml 6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。
貯存	≤-20℃	避免熱源或太陽直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。
穩(wěn)定性	6個(gè)月

6、試劑盒成分

注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分

數(shù)量	標(biāo)志	成分
1×12×8	MTP	包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。
1×6×2.5ml	CAL A-F	標(biāo)準(zhǔn)品A-F，即用 腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml (0;8;27;82;273;819nmol/L) 去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL (0;30;89;296;887;2955nmol/L) 多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL (0;78;228;750;2938;14688nmol/L) 內(nèi)含[-]腎上腺素， [-]去甲腎上腺素， [-]多巴胺(有生物活性), 0.1M的HCl
1×2×2.5ml	CONTROL 1+2	質(zhì)控品1+2 即用,含: [-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素， [-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl, 具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽.
1×250μL	ENZCONJ CONC	酶聯(lián)物 濃縮型（100×） 內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液， HCl，0.01%的NaN3
2×	EXTRPLATE	提取板（微孔板） 每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。
1×60ml	EXTRBUF	提取緩沖液 粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN3
2×1.25ml	COMT LYO	COMT凍干粉 內(nèi)含:兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN3
1×2ml	COMT ADD	COMT添加劑 內(nèi)含:人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。
1×7ml	ANTISERUM DO	去甲腎上腺素抗血清 紫羅蘭色，即用， 內(nèi)含:抗去甲腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。
2×1.25ml	COENZ	酶聯(lián)復(fù)合物 即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。
1×3ml	ENZBUF	酶緩沖液 即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。
1×17ml	RELEASEBUF	Release緩沖液 黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。
1×3ml	ACYLREAG	酰化試劑 即用，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。 注意：有毒，高可燃性。
1×50ml	WASHBUR CONC	洗滌液 濃縮型（10×） 內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN3
1×9×	PNPP SUBS	PNPP底物片 內(nèi)含：對(duì)硝基苯磷酸（PNPP）
1×27ml	PNPP BUF	PNPP底物緩沖液 即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN3
1×15ml	PNPP STOP	PNPP終止液 即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA
3×	FOIL	粘性金屬板