ELISA實驗是一個非常嚴謹、極其考驗操作者技巧和經(jīng)驗的實驗，檢測結果數(shù)值低、標準曲線梯度差、背景值高、變異系數(shù)大等諸多問題也是兵家常事。有很多客戶向我們咨詢，ELISA實驗結果數(shù)據(jù)總是偏低，不知道是什么問題。恒遠生物就為大家總結一下具體原因，一起來看看吧！
一、整體OD值偏低或無信號：
1.試劑盒組分失活
相應對策：使用新的試劑盒，按照說明書要求保存試劑盒
2.試劑盒組分未平衡
相應對策：試劑盒每個組分都需要平衡至室溫后進行實驗
3.試劑混用或混合不充分
相應對策：保證使用試劑盒內(nèi)完整一套試劑進行實驗，保證溶液充分混合
4.洗液被污染
相應對策：配制新的洗液
5.洗滌液浸泡時間過久或洗板次數(shù)過多
相應對策：按照說明書的要求進行操作
6.孵育時間不充分
相應對策：保證充足的孵育時間
7.孵育溫度不穩(wěn)定
相應對策：檢查恒溫箱，確保孵育溫度穩(wěn)定
8.生物su化抗體或HRP酶結合物不足
相應對策：保證濃縮液取量準確且稀釋完
9.生物su化抗體或酶結合物稀釋不正確或步驟顛倒
相應對策：按照說明書的步驟和要求進行操作
10. 未加終止液
相應對策：反應結束時，確保每孔加入終止液終止反應
11.終止后未及時讀板
相應對策：終止液終止反應后需要在10min內(nèi)進行讀板操作
12.酶標儀設置錯誤
相應對策：在酶標儀上檢查波長和濾光片設置
二、標曲線性佳但樣本OD值偏低
1.標準品部分降解
相應對策：按照說明書推薦方式保存標準品。開封后的標準品應以高濃度用EP管分裝凍存，保存于-20℃，半個月內(nèi)使用有效。
2.標準品復溶不當
相應對策：打開前將標準品短暫離心，檢查復溶后是否有未溶解的物質(zhì)
3.標準品稀釋不正確
相應對策：按照說明書要求，保證按正確倍比梯度稀釋
恒遠生物品牌ELISA試劑盒推薦：
小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
小鼠白介素17A(IL-17A)ELISA試劑盒
小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
人胰島素（INS)ELISA試劑盒
人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
人腫瘤標志物(CA724)ELISA試劑盒
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒
大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒
大鼠激素敏感性脂肪酶（HSL）ELISA試劑盒
植物赤霉素12（GA12）ELISA試劑盒
植物赤霉素1(GA1)ELISA試劑盒
植物赤霉素(GA)ELISA試劑盒
植物超氧化物歧化酶（SOD）ELISA試劑盒
植物查爾酮異構酶(CHI)ELISA試劑盒 活性
馬鈴薯X病毒（pvx）ELISA檢測試劑盒-定性
點擊交流